-Detailed Information [JCRB0525]-

JCRB0525 TIG-2M-30

細胞情報

Important Notice(s)

Notes for the cultivation of human normal diploid cells (JCRB05**) : ヒト正常二倍体細胞の取り扱い上の注意点

Notes for the cultivation of human normal diploid cells (JCRB05XX)

Some lots of cell lines registered as JCRB05XX were frozen by using glycerol as cryoprotectant instead of DMSO. The cryoprotectant used was described on data sheet of the cell line. In the case of cells frozen using glycerol, the method for re-cultivation should be as follows.

1. Thaw the ampule contents as quickly as possible in 37 C water bath.

2. Under sterile condition, aspirate the ampule contents (about 1 ml) and transfer them to culture dish (6-cm diameter) or 25cm2 culture flask containing 4 ml culture medium. Do not centrifuge the ampule contents, because the replacement of glycerol is very slow and centrifugation/resuspension causes osmotic shock to the cells.

3. Cultivate the cells in CO2 incubator at 37 C for 12-16 hrs.

4. Exchange the all culture medium by fresh medium.

JCRB05**番代で登録されているヒト正常二倍体細胞の凍結細胞アンプル取り扱い上の注意

ヒト正常細胞は、凍結アンプルを入手してから融解再培養のプロセスで、生存率の低下をおこしやすいとされています。細胞凍結アンプルの温度上昇を極力回避するよう、以下の点にご注意ください。

①細胞凍結アンプルの取り扱い

受領したヒト正常二倍体細胞は、その日のうちに保管容器に移すか融解再培養を行ってください。保管には液体窒素保存容器を推奨します。-80℃超低温槽での長期保管はお勧めしません。保管容器に移す場合は、移動プロセスの間での凍結アンプルの温度上昇が致命的になるので、これを可能な限り回避してください。例えばドライアイスからの取り出しを保管容器のすぐそばで行う、アンプルホルダーを前もって液体窒素で冷却して用いるなどです。

②凍結アンプルの融解再培養

融解再培養する場合は、ドライアイス入り輸送箱、または液体窒素凍結細胞保管容器から取りだした凍結アンプルを温度上昇させることなく（室温においたりすると致命的になります）、前もって用意した温水（約37℃）に素早くつけて、振りながら融解してください。

③JCRB05**番台の細胞には凍結保護剤としてDMSOを用いて凍結しているものとglycerolを用いて凍結しているものがあります（添付のデータシートに記載しています）。この二つでは融解・再培養の方法が異なります。

(1)DMSOを用いた場合の凍結細胞の融解・再培養

1. 凍結保存容器から取りだしたアンプルを、直ちに37℃-40℃の温水にいれて、軽く振りながら素早く解凍する（このステップが最も重要）。この際、ガラスアンプルの破裂の危険があるので、防護面や厚手の保護手袋を装着し、顔や首、手を防護すること。

2. ガラスアンプルを70%エタノールで消毒し、開封する。(アンプルのネックにはあらかじめヤスリが入っています)

3. 融解後、アンプルの内容（約1mlです）をパスツールピペットなどで吸いとり、9mlの冷やした培養液に加えて、1000 rpm，5 min 遠心する。細胞沈殿を5mlの培養液に浮遊し、6センチシャーレ一枚、または25cm2 フラスコ一本にいれて再培養を行う。(過度の希釈は増殖、生存率の低下を招きます)

(2)glycerolを用いた場合の凍結細胞の融解・再培養

1.2.はDMSOの場合と同じ手順で行う。

3. 融解後、4mlの培養液の入った培養ディッシュ（6センチシャーレ、または25cm2 フラスコ）に解凍したアンプルの内容を入れて炭酸ガスインキュベーターに静置する。翌日培地交換する。
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本細胞は筋芽細胞ではありません

[JCRB0525 TIG-2M-30の性状について]

TIG-2M-30は、ヒト胎児筋組織由来の正常線維芽細胞です。

筋由来ではありますが筋芽細胞ではなく、筋細胞への分化能は確認されておりません。

本細胞はその由来からしばしば筋芽細胞と混同されるため、研究の目的に合致するかどうかご確認の上ご利用くださいますようお願い申し上げます。



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細胞種類：一般細胞 (細胞分譲手数料はこちら)

細胞番号(JCRB)	JCRB0525	細胞名	TIG-2M-30
生物種(日本語)	ヒト	組織名(日本語)	筋組織
コメント(日本語)	正常二倍体線維芽細胞, 筋由来(筋芽細胞ではない), PDL=約30	プロフィール	muscular tissue derived normal diploid fibroblast (not myoblast), PDL=about 30
別名	TIG-2M	動物名	human
系統名		学名・属名	Homo
種名	sapiens	性別	F
年齢・月齢	13 week fetus	細胞識別情報	available
（癌）原発組織名	muscular system	病歴情報	normal
転移の有無（Y/N）		（癌）転移組織名
遺伝的性質	muscular tissue-derived normal diploid fibroblast	細胞寿命
ｸﾗｲｼｽＰＤＬ		形態	fibroblast-like
一般性状	muscular tissue-derived normal diploid fibroblast	細胞分類	normal
細胞樹立者名	Tky.Inst.Geront.	細胞寄託者	Ooka,H.
分譲時制限		コメント	Refer attached instruction .
入手年	1989	培養培地	Eagle's minimal essential medium with 10% fetal bovine serum.
継代方法	Cells are treated with 0.25% trypsin and 0.02% EDTA when subculturing cells. Subculture every 6 days and change medium 3-4 days after subculture.	継代時細胞数	Split ratio=1/4
人種		炭酸ガス濃度	5 %
採取組織名	muscle	組織型

ウイルスDNA・RNA検出検査 (Detection of virus genome fragment by Real-time PCR)
ウイルスDNA 検出検査	tested				ウイルスRNA 検出検査	tested
	CMV	-	parvoB19	-		HCV	-	HTLV-1	-
	EBV	-	HBV	-		HIV-1	-	HTLV-2	-
	HHV6	-	HTLV-1	-		HIV-2	-	HAV	-
	HHV7	-	HTLV-2	-		-/negative. +/positive. nt/not tested. (positive (+) does not immediately mean the production of infectious viral particles.)
	BKV	-	HIV-1	-
	JCV	-	HIV-2	-
	ADV	-	HPV18	-
Notes

Link
Cellosaurus(ExPASy) Cellosaurus (ExPASy)はneXtProtプロジェクトの一環として、SIB - Swiss Institute of BioinformaticsのCALIPHOグループのAmos Bairoch博士によって開発されました。Cellosaurusは細胞株に関する様々な情報を集約させたデータベースになっています。JCRB細胞バンクに登録されている細胞株については、右のリンクから情報を得ることができます。	CVCL_3204

Link

Cellosaurus(ExPASy) Cellosaurus (ExPASy)はneXtProtプロジェクトの一環として、SIB - Swiss Institute of BioinformaticsのCALIPHOグループのAmos Bairoch博士によって開発されました。Cellosaurusは細胞株に関する様々な情報を集約させたデータベースになっています。JCRB細胞バンクに登録されている細胞株については、右のリンクから情報を得ることができます。

CVCL_3204

Reference
Pubmed id:7421303	Cell-surface changes accompanying aging in human diploid fibroblasts: effects of tissue, donor age and genotype. Aizawa S,Mitsui Y,Kurimoto F,Matsuoka K Mech Ageing Dev. 1980 Jul;13(3):297-307

Images

細胞番号	JCRB0525	細胞名
培養ロット番号	10132009	培養種別	distribution
培地	Eagle's minimum essential medium with 10% fetal bovine serum (GIBCO Cat. # 10099). This lot was frozen using DMSO.	培養温度	37 C
継代時細胞数（濃度）	approx. 2 - 3 x 10^4 cells/ml	継代方法	Cells were harvested after treatment with 0.25% trypsin.
増殖速度	approx. 43 hrs	凍結時生細胞濃度	6.6 x 10^5
凍結時生細胞率	91.0	使用抗生物質	free
継代数	Unknown (2 at bank)	PDL数（プライマリ）	42
ﾏｲｺﾌﾟﾗｽﾞﾏ検出	-	細菌汚染検出	-
真菌汚染検出	-	ｱｲｿｻﾞｲﾑ検査・動物名	Confirmed as human by NP, G6PD (type B), MD.
染色体モード		染色体情報
表面抗原		DNA Profile (STR)
接着性	Yes	導入外部遺伝子
凍結培地	10% DMSO, 20% FBS - EMEM	炭酸ガス濃度	5%
解凍後生細胞率		追加情報

細胞番号	JCRB0525	細胞名
培養ロット番号	R021	培養種別	distribution
培地	Eagle's minimal essential medium with 10% fetal bovine serum. This lot was frozen using DMSO.	培養温度	37 C
継代時細胞数（濃度）	split ratio = 1:4	継代方法	0.25% trypsin in Ca, Mg-free PBS
増殖速度		凍結時生細胞濃度	1.7 x 10^6
凍結時生細胞率	93.6	使用抗生物質	100 units/ml penicillin and 100 ug/ml streptomycin
継代数		PDL数（プライマリ）	37
ﾏｲｺﾌﾟﾗｽﾞﾏ検出	-	細菌汚染検出	-
真菌汚染検出	-	ｱｲｿｻﾞｲﾑ検査・動物名
染色体モード		染色体情報
表面抗原		DNA Profile (STR)
接着性		導入外部遺伝子
凍結培地		炭酸ガス濃度
解凍後生細胞率		追加情報

細胞番号	JCRB0525	細胞名	TIG-2M-30
培養ロット番号	11022015	培養種別	distribution
培地	Eagle's minimum essential medium with 10% fetal bovine serum (FBS; GIBCO Cat. # 10091). This lot was frozen using DMSO.	培養温度	37 C
継代時細胞数（濃度）	2.0 - 3.3 x 10^4 cells/mL	継代方法	Cells were harvested after treatment with 0.25% trypsin and 0.02% EDTA.
増殖速度	approx. 3 days	凍結時生細胞濃度	9.4 x 10^5
凍結時生細胞率	92	使用抗生物質	free
継代数	Unknown (3 at bank)	PDL数（プライマリ）	42.7
ﾏｲｺﾌﾟﾗｽﾞﾏ検出	-	細菌汚染検出	-
真菌汚染検出	-	ｱｲｿｻﾞｲﾑ検査・動物名
染色体モード		染色体情報
表面抗原		DNA Profile (STR)
接着性	Yes	導入外部遺伝子
凍結培地	10% DMSO, 20% FBS - EMEM	炭酸ガス濃度	5%
解凍後生細胞率	92	追加情報

国立研究開発法人 医薬基盤・健康・栄養研究所 JCRB細胞バンク

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